世界*實(shí)驗(yàn)材料供應(yīng)商Zymed Laboratories Inc正式授權(quán)上海起發(fā)為其中國(guó)代理，Zymed Laboratories Inc 在一直是行業(yè)的*,一直為廣大科研客戶提供zui為優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為中國(guó)科研客戶帶來的產(chǎn)品，的服務(wù)， 簽約Zymed Laboratories Inc 就是為了給廣大科研客戶帶來更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿意將是我們zui大的收獲

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位于美國(guó)生物科技重要城市南加州的圣迭亞哥市，是一家以生產(chǎn)免疫學(xué)檢測(cè)試劑為主的綜合性生物技術(shù)公司。Zymed公司的業(yè)務(wù)主要分為兩大領(lǐng)域：生命科學(xué)和臨床病理診斷。Zymed公司的所有產(chǎn)品反映了其在的自我定位策略－即一家重視質(zhì)量、專注于全面解決問題的開發(fā)商、生產(chǎn)商和營(yíng)銷商。它在范圍內(nèi)為生命科學(xué)研究、臨床研究、癌癥診斷領(lǐng)域提供高質(zhì)量的試劑和試劑盒。Zymed公司歷史悠久，在抗體設(shè)計(jì)、開發(fā)、修飾、純化和生產(chǎn)方面有21年的專業(yè)研究史。Zymed公司得到 ISO 13485認(rèn)證。

目前是Invitrogen大家庭中的一員。

公司：http://zh.invitrogen.com

大鼠總蛋白 (TP)說明書

產(chǎn)品名稱： 大鼠總蛋白 (TP)說明書

產(chǎn)品貨號(hào)： TP

產(chǎn)品規(guī)格： 48T/96T

試劑級(jí)別： 試劑級(jí)

產(chǎn)品產(chǎn)地： 美國(guó)

產(chǎn)品商標(biāo)： USA

認(rèn)證品牌：Zymed Laboratories (Invitrogen Zymed Laboratories)

保存與運(yùn)輸： 低溫

產(chǎn)品詳細(xì)描述

                   大鼠總蛋白 (TP)酶聯(lián)免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
藥品名稱：
通用名：大鼠總蛋白 (TP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
使用目的：
本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿、或相關(guān)組織液中總蛋白 (TP)含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠總蛋白  (TP)水平。用純化的大鼠總蛋白
(TP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入總蛋白 (TP)，再與HRP
標(biāo)記的總蛋白 (TP)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB
顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深
淺和樣品中的總蛋白 (TP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過
標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠總蛋白 (TP)含量。
試劑盒組成
1 20 倍濃縮洗滌液 30ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（720μg/ml） 0.5ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張  
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個(gè)
標(biāo)本處理及要求
1．血清、血漿、腦脊液、腹腔液標(biāo)本可直接測(cè)定；
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
3．采集后盡早進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反
復(fù)凍融。
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔 10 孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)
準(zhǔn)品 100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在*孔和第二
孔中先各取50μl棄掉；再各取50μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別
加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，混勻后，再各取 50μl 分別加到第五、第六孔中，再在第五、第
六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取 50μl 分別加到
第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，混勻后從第七、第
八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，
混勻后從第九第十孔中各取 50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為 50μl，濃度分別為
480μg/ml，320μg/ml ，160μg/ml，80μg/ml，40μg/ml）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣
品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣
品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。   
4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，
重復(fù) 5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光
15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加
液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣
OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋
即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間
控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本O
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測(cè)定
算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10.  如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
檢測(cè)范圍：
20μg/ml -500μg/ml
規(guī)格：
96 人份/盒
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個(gè)月

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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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